اسرجبؽ رعذد اشكبل اندCYP17 يع يزالصيخ رك ظ ان جب غ PCOS نذ غبء يسبفظخ طالذ انذ / انعشاق Plymorphism of CYP17 for Polycystic Ovarian Syndrome in Women of Salah Al-Din Provence/ Iraq عم م زغ انعبط * عبدل ف ص ش بة* ذ م عجذ ان بد ع ش و ١ خ ا ؼ / عب ؼخ ا ط و ١ خ ا ؼ / عب ؼخ رىش ٠ ذ* Hadeel Abdulhadi Omear Adil fauzy Shehab* Akeel Husain Al-Assie* Collage of Science/ Mosul University Collage of Science/ Tikrit University* انىعزخهض 17 -انفب ذس كغه ض 20 17 ال ض عزجش خ CYP17 ان فزبذ ف ان غبس اال ؼ نهغز ش ذاد اند غ خ ار شفش نال ض. رؼ ذ انذساعخ انسبن خ يعشفخ عاللخ زا اند يع يزالصيخ انهز هعجب د سا ي ب ف ا زبج ان شي بد انغز ش ذ خ اند غ خ رك ظ ان جب غ PCOS نه غبء ف ع اال دبة ان برح ي خهم شي. رى خ ع ع بد انذو ي يد عز ي ان غبء ان د عخ 25 إيشأح عه خ نهكشف ع خ د 98 إيشأح يظبثخ ث زالصيخ رك ظ ان جب غ ان د عخ انثب خ رزك ي اال ن رزك ي ن م انطبفش انجش ن زا اند ركشاس اال بؽ ان ساث خ نذ ان ظبثبد انطفشح ػ زا اند ي ثى زغبة انزكشاس االن ه نال ( FSH, LH, BMI نه د عز ل بط يغز ان شي بد اند غ خ يمبس ز ب يع انغه بد ك ب رى زغبة يعبيم كزهخ اندغى BMI ان ش ؼبد انغه بد ف نذ ان د عز لذ اظ شد ان زبئح خ د فش ق يع خ ث )Prolactin, Testosterone ( FSH, ث ب نى رظ ش ا فش ق يع خ ن شي 0.05 ع ذ يغز يع خ Prolactine( )LH, يغز شي TT يخزهف )Testostern ث ان د عز ع ذ فظ ان غز. ك ب رى انسظ ل عه ثالثخ ا بؽ ساث خ يز بثم انض دخ ثش T نذ ان غبء ان ش ؼبد 55.o الم ثكث ش ي انزكشاس انض دخ TC يز بثم انض دخ انطبفش CC لذ ثهغ انزكشاس االن ه نالن م C نذ ان غبء ان ش ؼبد 0.44 اكثش ي ػعف يب ف 0.82 ف ز كب انزكشاس االن ه ن فظ االن م نذ ان غبء انغه بد CC ع ذ ان غبء انغه بد ظ س فمؾ ع ذ ان غبء انغه بد. 0.18 ك ب اشبسد ان زبئح انسبن خ ان عذو ظ س ان ؾ ان ساث C( ف )T ان غبء ان ظبثبد زا ذل عه خ د اسرجبؽ اػر ث زا اند يزالصيخ رك ظ ان جب غ ار ك اعزجبس انطفشح ك ؤشش نه شع. انكه بد ان فزبز خ : رعذد اشكبل اند PCOS CYP17 Abstract CYP17 gene is the key in the metabolic pathway of sexual steroids, it codes for two enzymes 17 alpha hydroxylase and 17, 20 lyase who play an important role in the production of sex steroid hormones. The current study included study of the relationship of this gene with PCOS women in reproductive age. Blood samples were collected from two groups of women: first group consists of 98 women infected with polycystic ovaries syndrome, the second consists of 25 healthy women to detect the presence of mutation within the gene, then calculate allele frequency of mutant and wild allele for this gene, then repeat genotypes in infected women and compared with healthy once, were calculated body mass index BMI of two groups and measure the level of sex hormones (LH, FSH, Prolactin, Testosterone) in both groups, were the results showed significant differences between patients and healthy women in BMI and the level of hormones (LH, Prolactine) while there is no significant differences in the (FSH, Testosterone) hormone. Three pattern of genotype were obtained: TT, homozygous wild, (TC) much lower than the frequency in the healthy 0.82 while the frequency of allele C among patients 0.44, which is more than double than in healthy 0.18. The current results showed absence CC genotype in healthy women and appeared only in women with PCOS. This monitor the presence of link between this gene and PCOS as may be considered the mutation -34 (T C) in the promoter of gene CYP17 marker of the disease. Key words: PCOS, CYP17, Polymorphism ان مذيخ: رؼذ زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ (PCOS) Polycystic Ovarian Syndrom احذح ا ا شاع ا خ ا ش ا ز رظ ١ ت %7 ا غبء ف ع اال غبة [1]. لذ الزشحذ ا ظ خ اال سث ١ خ ؼ االع خ ا زىبصش ا جشش European Society of Human American Society ف اخش مبء ب غ ا ظ خ اال ش ٠ ى ١ خ طت ا زىبصش )ESHRE( Reproduction and Embryology )ASRM(for Reproductive Medicine ف ػب 2003 ؼب ١٠ ش زشخ ١ ض زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ ع د اص ب ػ االل االػشاع ا زب ١ خ ف ا شأح: 50
ل خ ا ػذ االثبػخ I. ػال بد عش س ٠ خ /ا ثب ٠ و ١ ١ بئ ١ خ السرفبع اال ذس ع ١ بد.II سؤ ٠ خ ا زى ١ غبد ثبعزخذا ع بص ا زظ ٠ ش ثب عبد ا ف ق ا ظ ر ١ خ [2]..III hirsutism حت ا شجبة Ace اػطشاثبد ا ذ سح ا ش ش ٠ خ رزظف ا ؼال بد ا غش ٠ ش ٠ خ ا شافمخ زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ ثب شؼشا ١ خ obesity خبطخ ف طمز ا غ خ Irregular cycle ا ؼذا االثبػخ an ovulation وز ه فب ا غبء ا ظبثبد ٠ ؼب ١ ا خظش ا جط ثغجت اسرفبع ا ش بد ا زوش ٠ خ.3androgens. غبساد ا االػشاع ا غش ٠ ش ٠ خ ا ؤششاد ا ى ١ ١ بح ٠ ١ خ ز ا زالص خ زجب ٠ خ ف ب ه طؼ ثخ ف رحذ ٠ ذ ا غجت ا شػ زالص خ ح ٠ ١ خ زؼذدح ى ا رى ا غجت ا شػ زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ رزؼ ا غبساد ا ح ٠ ١ خ اال ٠ ؼ ١ خ ا ز ظ ١ ١ خ ج بء [6] ٠ جذ ثشى ض ١ ش ا اغ ت [5] غبساد ر ظ ١ ص ا غغ ا ش بد ا غز ١ ش ٠ ذ ٠ خ [4] ا غبساد ا ح ٠ ١ خ الفشاص اال غ ١ P450c17α. ى ا خ ف ر ظ ١ اال ض ٠ بد ا ظ ؼخ غز ١ ش ٠ ذاد ا ظبثبد رؼب اسرفبع ف غز افشاص اال ذس ع ١ بد 17 -ا فب ١ ذس وغ ١ ١ ض -α 20,17 hydroxylase 17 ال ١٠ ض ٠17,20-lyase ؼت د سا ب ف اسرفبع ا ز رزى اال ض ٠ ب CYP17 ا ز ٠ شفش ز ٠ اال ض ١ ٠ ح ١ ش ا اال ذس ع ١ بد ػ ذ ا غبء ا ظبثبد ثب 7 PCOS ز ه فمذ ر دساعخ رؼذد اشىبي ع ١ 10 ف ا طمخ ٠ زه 24.3 8 بؽك رشف ١ ش )Exons( [8] ٠ ؼجش ػ زا زا ا غ ١ ٠ مغ ػ ا زساع ا ط ٠ ىش ع سل ا غ ١ ف ا غذح ا ىظش ٠ خ خال ٠ ب غ ذ ا ج ١ غ ثبالػبفخ ا ا غ ١ ظ ا خظ زا ثبالػبفخ ا ا ١ خ زا ا غ ١ ف ا زبط اال ض ٠ بد ا ز رى االعزش ع ١ بد ح ١ ش ر ؼت د سا ف رح ٠ ا جش عغز ١ ش ا جش و ١ ١ ا ا ذس ع 9] ١ ]. CYP17Cػ ذ ا لغ - 34bpاوزشفذ ال ي شح لج [10] وطفشح ف لبػذح زش ع ١ ١ خ احذح رظ ش T ا ا طفشح ف ع ١ رؼذد اشىبي زا ا غ ١ SNP رمغ ف طمخ ا جبد ء Promoter ا غز غخخ ا غ ١ ش زشع خ غ ١ )UTR( لذ الزشػ ا ز ا طفشح رغجت ص ٠ بدح ف رؼج ١ ش ٠ خ ايع ١ خالي ص ٠ بدح ػ ١ خ االعز غبخ غ ١ ثب زب ص ٠ بدح ا ش بد ا غز ١ ش ٠ ذح ف ا ذ ظ س اػشاع ا شع ػ ا شأح[ 11 ]. CYP17 غ زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ ى ا غ ١ ا فزبػ ف ا غبس ا ذف ز ا ذساعخ دساعخ اسرجبؽ رؼذد اشىبي ا غ ١ اال ٠ ؼ العزش ع ١ بد. ان اد ؽشائك انع م: ر ع غ ػ ١ بد ا ذ 98 ا شأح ظبثخ ث زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ 25 PCOS ا شأح ع ١ خ ف ع اال غبة )40-16( ف حبفظخ )5-2( ح ١ ش ر عحت 10 طالػ ا ذ ٠ فزشح 1 حض ٠ شا ا 1 ا ٠ ي 2011 اخزد ا ؼ ١ بد ا غبء اص بء ا ذ سح ا ش ش ٠ خ ا ١ Acid Citric (ACDS 2 ػ ١ خ ا ذ حفظذ ف ا بث ١ ت اخزجبس حب ٠ خ ػ ح ي ا ذ و ا شأح ص رمغ ١ ب ا لغ ١ )-C 86( ح ١ اعزخالص ا DNA ب ا ب ػ ١ خ ا ذ )Dextrose Solution و ب غ زخضش خض ذ رحذ ا زغ ١ ذ ا فبئك ثذسعخ ا زجم ١ خ فمذ ر فظ ا ظ العزخذا ف ا فحض ا ش و ب ر ا ٠ غبدIndex )kgm/m )2 )BMI( Body mass ش ٠ ؼبد رغغ ١ ؼ بد ػ و ا شأح خالي ء االعز بسح ا خبطخ ثب جحش. انم بط ان شي : ر ل ١ بط ا ش بد ا غ غ ١ خ غبء Prolactin) (LH, FSH, Testosterone, ثبعزخذا ع بصMinividas ػذح االخزجبس ا غ ضح ششوخ Biomerieux اال ب ١ خ[ 12 ] ح ذ زبئظ ا ش بد احظبئ ١ ب ثبعزخذا اخزجبس )T-test( T ػ غز ؼ ٠ خ 0.05. انزسه م ان ساث : ف ع ١ CYP17 ا ٠ غبد رؼذد اشىبي ( T (C ر اعزخالص ا DNA د ا غبء ثبعزخذا ؽش ٠ مخ [ 13 ] ر ا ىشف ػ ا طفشح PCR ػ ػ ١ بد ا DNA ثبعزخذا ا جبد ء RFLP-PCR ر ه خالي اعشاء رفبػالد زا ا غ ١ ثبعزخذا ا ؤشش ا ساص وب ذ R:5 -AGGCTCTTTGGGGTACTTG-3 F:5-CATTCGCACTCTGGAGTC-3 : ا زخظض ا زب ى بد ا زفبػ وبالر : DNA 10 mmtris- 250µM dntps 1U Taq DNA polymerase 10 pmol Primer 50 ng PCR ثزطج ١ ك ا ج ب ظ 9.0).)Bioneer- PCR PreMix( 1.5 mm MgCl 2 30 mm KCL HCl (ph ص ٠ ز ادخب ب ع بص ذح دل ١ مخ ثؼذ ب شح خ اعزطب خ بئ ١ خ ا زب C 94 ذح 4 دلبئك ٠ زجؼ ب 35 د سح رزؼ C 94 ذح دل ١ مخ C 57 ذح دل ١ مخC 72 PCR Product ثبعزخذا اال ض ٠ DNA ثحغ ٠ ز 459bp رمط ١ غ برظ ا زفبػ C 72 ذح 7 دلبئك ثؼذ ا حظ ي ػ لطؼخ ا C 73 ذح صالس عبػبد ثؼذ ب ٠ ز رشح ١ برظ ا زمط ١ غ MspA1I ثبػبفخ 5 حذاد اال ض ٠ ى ػ ١ خ ا زحؼ ١ ػ دسعخ,T TC,CC حغت ؾ ا زمط ١ غ ػ ال االوبس ص ث غجخ %2 ا زظج ١ غ ثظجغخ االص ١ ذ ٠ ثش ب ٠ ذ ع ف رظ ش صالس ا بؽ ساص ١ خ.[14] ان زبئح ان بلشخ: 1- ا غز ٠ بد ا ش ١ خ ؼب وز خ ا غغ : اظ شد ا زبئظ ا ج ١ خ ف عذ ي )1( غز ٠ بد ا ش بد ا غ غ ١ خ ؼب وز خ ا غغ BMI ذ ا ش ٠ ؼبد مبس ز ب ثب غ ١ بد. خذ ل )1(: ان ز عؾ انسغبث ن غز بد ان شي بد يعبيم كزهخ اندغى نه ظبثبد ثبنPCOS يد عخ انغ طشح parameters Mean±(SE) Mean± (SE) PCOS Control BMI(kg/m 2 ) 28.6 (0.5) 24.86 (5.02) FSH (mlu/ml) 6.34 (0.7) 5.69 (0.19) LH( mlu/ml) 5 (0.6) 3.34 (0.15) Prolactin( ng/ml) 22.6 (1.7) 16.12 (0.7) Testosteron( ng/ml) 0.42 (0.17) 0.16 (0.013) 51
)24( ح ١ ش رشوضد ا غ خ ف ا بؽك )28.6( مبس خ ثب غ ١ بد ح ١ ش عذ بن اسرفبػب ف ؼب وز خ ا غغ ذ ا ش ٠ ؼبد ا ح ١ طخ ثب خظش ا جط لذ اشبسد ا ظبدس ا اسرفبع اال ذس ع ١ بد ب ش ا شح ا خظ ا ٠ ى Testosterone د سا ب ف ص ٠ بدح ا ص ذ ٠ غخ ض ٠ بدح رى ٠ لج خال ٠ ب ا مشاة ا ج ١ غ ثب ز ١ غخ احذاس ا غ خ ح ي طمخ ا خظش [3]. )5( LH ذ ا ش ٠ ؼبد مبس خ ثب غ ١ بد ) غ ػخ ا غ ١ طشح( )3.34( ا و ب اظ شد ا زبئظ اسرفبع ف غز ا ش ا ر ١ Estrogen, Progesterone ح ١ ش ا زا ا ش ٠ ضجؾ اسرفبع غز ش LH ف ا ش ٠ ؼبد وب ز ١ غخ ا خفبع غز ٠ بد ث عبؽخ اسرفبع غز ٠ بد ز ا ش بد خالي ا ١ خ ا زغز ٠ خ ا شعؼ ١ خ[ 15 ]. 6.34 غ غ ػخ ا غ ١ طشح 5.69 ا ب غز ش ا حفض غش ٠ جبد FSH فب ٠ ظ ش اخزالفب اػحب ث ١ رشو ١ ض ذ ا ش ٠ ؼبد ح ١ ش ا ٠ ى بن فشلب ؼ ٠ ب ف غز زا ا ش ث ١ ا غ ػز ١. مبس خ ثب غبء 22.6 ا ظبثبد ث زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ Prolactine فمذ وب غز ا ػب ١ ب ذ ا غبء ا ب ثب غجخ ش ا ح ١ ت ا غ ١ بد 16.12 لذ رى ز ا ض ٠ بدح ثغجت ص ٠ بدح رحف ١ ض ا خال ٠ ب ا غؤ خ ػ ا زبع ف ا فض اال ب غذح ا خب ١ خ رذػ Lactotrophes ب لذ ٠ ؤد ا ص ٠ بدح افشاص [16]. و ب ث ١ ذ ا زبئظ ع د اسرفبع ف غز ش ا شح ا خظ ذ ا غبء ا ش ٠ ؼبد 0.42 مبس خ ثب غ ١ بد 0.16 ى رى بن فش لبد ؼ ٠ خ ث ١ ا غ ػز ١ ثب غجخ غز زا ا ش. Prolactine LH ث ١ ا ش ٠ ؼبد BMI غز ا ش ١ خالي ا ذساعخ ا ش ١ خ رج ١ ا بن فش لبد ؼ ٠ خ ف ا غ ١ بد ال ر عذ فش لبد ؼ ٠ خ ف غز ش FSH, Testosterone ث ١ ا غ ػز ١ ػ ذ غز ؼ ٠ خ )0.05(. Follicular ا ا ض ٠ بدح ا ؼ ٠ خ ف غز ٠ بد ا ش ا ر ١ غ ا ؼذا ع د فش لبد ؼ ٠ خ ف ا ش ا حفض غش ٠ ت Axis pituitary- رحذ ا بد ٠ ى ا ٠ فغش ػ اعبط ع د اخالي ف ح س ا خب ١ خ )FSH( Stimulation Hormon hypothalamus ب ٠ ؤد ا ص ٠ بدح ا زحشس ا جؼ ش ا ر ١ رحذ ا بد[ 17 ]. 2- رسذ ذ اشكبل اند :CYP17 MspA1I زا C ا ز حظ ذ ف ع ١ CYP17 ػ ذ ا لغ 34- bp اعزحذصذ لغ لطغ ال ض ٠ ا مبؽغ T ا ؽفشح االعزجذاي اد ا وغش لطؼخ ا ذ ب ا زؼبػفخ ثب PCR ا ز حغ ب 459bp ا لطؼز ١.[14,18,19124bp] 335bp Homozygous غ ١ ش ؽبفش ع ف رظ ش حض خ احذح ثؼذ ث ب ا زا ا غ ١ ٠ زى ا ١ ١ زا ارا وب ا شخض ز بص ا ض ٠ غخ (1( ا ب ارا TT ر ه ال الر عذ ؽفشح رحذس ىب ٠ زؼشف ػ ١ اال ض ٠ و ٠ مطؼ شى ٠ ض ا طشاص ا ساص ا زمط ١ غ 459bp 3 حض (bp, 335 124, Heterozygous ا ٠ ح ا ١ ؽبفش اخش غ ١ ش ؽبفش ع ف رظ ش ذ ٠ ب وب ا شخض زجب ٠ ا ض ٠ غخ 459( ٠ ض ثب طشاص ا ساص TC ح ١ ش ا ا حض خ 459bp ال ١ ا غ ١ ش ؽبف ا ب ايحض ز ١ 335(bp 124(, ب ال ١ ا طبفش )335 bp 124(, فمؾ ال اال ١ ١ حذس حذ س لطغ ثبال ض ٠ ا ب ف حب خ و ا شخض ٠ ح ا ١ ١ ؽبفش ٠ فغ ف رظ ش حض ز ١ ب لطغ ٠ ز ض ثب طشاص ا ساص.CC 1000 500 200 100 شكم )1(: ػر انطشص ان ساث خ نهطفشح -34bp نهد CYP17 100bp DNA Ladder انذن م انسد :M :TT انطشاص ان ساث ان ز بثم انغ ش ؽبفش : انطشاص ان ساث انغ ش يز بثم CC :انطشاص ان ساث ان ز بثم انطبفش TT ظبثبد ثب PCOS %28 ث ١ ب ف لذ اظ شد زبئظ زا ايثحش و ب ج ١ خ ف عذ ي )2( ا ا غجخ ا ئ ٠ خ طشاص ا ساص %36 ث ١ ب %54 ا ب ف غ ػخ ا غ ١ طشح فمذ ث غذ TC فمذ ث غذ غجز ثب ظبثبد غ ػخ ا غ ١ طشح %64 ا ب ا طشاص ا ساص ا طشاص ا ساص ا طبفش ف االCC ١ ١ ا ؼذ ظ س ػ غ ػخ ا غ ١ طشح وب ذ غجز ػ غ ػخ ا ظبثبد %17. خذ ل )2(: ػر انعذد ان غت ان ئ خ نهطشص ان ساث خ انثالس نه ظبثبد ثبنPCOS يد عخ انغ طشح ان ؾ ان ساث PCO Control No % No % TT 28 29 16 64 TC 53 54 9 36 CC 17 17 0 0 Total 98 100 25 100 52
ا اخزفبء ا طشاص ا ساص ا ز بص ا طبفش غ ػخ ا غ ١ طشح ٠ ذي ػ ا ١ خ زا ا غ ١ ف احذاس ا شع ح ١ ش ا اعز بع ا ١ ١ ؽبفش ٠ ػ ذ فظ ا شأح ٠ ؤد ا االطبثخ ثب شع زا ثبالػبفخ ا ا ص ٠ بدح غجخ ا زشو ١ ت ا ساص ا ز بص ا غ ١ ش ا طبفش TT ذ ا غ ١ بد مبس خ ثب ظبثبد ثب زى ١ ظ و ب اظ شد ا زبئظ ا ا زشدد اال ١ ال ١ ا غ ١ ش ؽبفش T وب ذ ذ ا ظبثبد ثب زى ١ ظ غب ٠ خ 0.55 ال ثىض ١ ش ب ع د ذ ا غ ١ بد 0.82 ا ب اال ١ ا طبفش C فمذ وب رشدد ذ ا ظبثبد 0.44 اوضش ػؼف رشدد ذ ا غبء ا غ ١ بد 0.18 زا ٠ ذي ػ اسرجبؽ ا طفشح ف زا ا غ ١ ث زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ ر ه ال ؽفشح االعزجذاي ف ا لغ 34- ف طمخ اي Promoter ف ا غ ١ ا ى ا رحذس خ ف ا ز ظ ١ ا غ ١ خالي رحف ١ ض ػ ١ خ االعز غبخ غ ١ ا رضج ١ ط ب ثب زب ا زغ ١ ش ف ا زؼج ١ ش ا غ ١ ب ٠ ؤصش ػ ا برظ ا جش ر اال ض ٠ ا ز ثذ س ٠ ى احذ اال ض ٠ بد ا خ ف ا غبس ا ح ١ ا ز ظ ١ ش بد ا غ غ ١ خ ب ٠ ؤد ا االطبثخ ث زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ [14] ا زبئظ ا ذساعخ ا حب ١ خ ارفمذ غ ا ذساعخ ا ز اعشا ب[ 18 ]ػ ا غز غ ا ب ح ١ ش اخزفبء ا طشاص ا ساص ا ز بص ا طبفش CC غ ػخ ا غ ١ طشح ى ب رزفك ؼ ث غجخ زا ا طشاص ا ساص ػ غ ػخ ا شػ ح ١ ش وب ذ ا غجخ ف غز ؼ ب غب ٠ خ %17 اػ ثىض ١ ش ب ف ا غز غ ا ١ ب ا ظبة ثب زالص خ 8%, ا ب ا غز غ ا ى س فب غجخ ا طشاص ا ساص CC ف ١ وب ذ %23 ػ غ ػخ ا غ ١ طشح ا ب غ ػخ ا شػ فمذ وب ذ غجخ زا ا طشاص ف ١ %33 [19] لذ اصجزذ ا ذساعخ ا حب ١ خ ا اال ١ ا طبفش C وب رشدد ػ غ ػخ PCOS اػ ب ف غ ػخ ا غ ١ طشح ال ٠ زفك غ [20] ا ز عذ ا ال ٠ عذ دغب ٠ ش وج ١ ش ف رشدد اال ١ C ث ١ ا شػ ا غ ١ بد ا ب [21] ا ز اعش ا ذساعخ ػ ا غز غ اال ش ٠ ى فمذ عذ ا ال ٠ عذ فشق ف ا زشدد اال ١ ث ١ ا غ ػز ١. ان ظبدس 1. Azziz, R., Woods, K.S., Reyna, R., Key, T.S., Knochemhauer, E.S. and Yildiz, B.O. (2004).The prevalence and features of the polycystic ovary syndrome in an unselected population, J.of Clinical Endocrinology and Metabolism.Vol.89: (6). pp. 2745-2749. 2. Unluturk, U., Harmanci, A., Kocaefe, C. and Yildiz, B.O. (2007). The genetic basis of the polycystic ovary syndrome: A literature review including discussion of PPAR. Hindawi Puplishing Corporation. Vol. 207. Pp1-23. 3. ا غبثش وبظ ح ذ عجغ. )2010(. ا ؼاللخ ث ١ ثؼغ االػشاع ا غش ٠ ش ٠ خ ثؼغ ؼب ١٠ ش ا ذ ا فغ ١ ع ١ خ ا ش ١ خ ا ى ١ ح ٠ ١ خ ذ ا غبء ا ظبثبد ث زالص خ رى ١ ظ ا جب ٠ غ. اؽش حخ دوز سا. و ١ خ ا ؼ. عب ؼخ ا ى فخ. 4. Norman, R.J., Davies, M.J., Lord, J. and Moran, I.J. (2002). The role oflifestyle modification in polycystic ovary syndrome.trendsendocrinol. Metab. 13: 251-257 5. Dunaif, A., Xia, J., Book, C. B., Schenker, E. and Tang, Z. (1995). Excessive insulin receptor serine phosphorylation in cultured fibroblasts and in skeletal muscle.a potential mechanism for insulin resistance in the polycystic ovary syndrome. J. Clin. Invest. 96: 801-810. 6. Kiddy, D.S., Hamilton-Fairley, D., Bush, A., Short, F., Anyaoku, V., Reed, M.J. and Franks, S. (1992). Improvement in endocrine and ovarian function during dietary treatment of obese women with polycystic ovary syndrome. Clin. Endocrinol. (Oxf). 36: 105-111. 7. Ehrmann, D.A., Rosenfield, R.L., Barnes, R.B., Brigell, D.F. and Sheikh, Z. (1992). Detection of functional ovarian hyperandrogenism in women with androgen excess New Engl. J. Med. 327: 157-162. 8. Souiden,Y., Mahdouani, M., Chaieb, K., ELhamel, R. and Mahdouani, K. (2011). Cyp 17 gene polymorphism and prostate cancer susceptibility in a Tunisian population.elsevier.35: 480-484. 9. Sharp, L., Cardy, A.H., Cotton, S.C. and Little, J. (2004). CYP17genepolymorphisms: Prevalence andassociation with hormone levels and related factore. AHuGEreview. AM J. Epidemiol. 160: 729-740. 10. Carey, A.H., Waterworth, D., Patel, K.,White, D., Little, J., Novelli, P., Franks, S. and Williamson, R. (1994). Polycystic ovaries and premature male pattern baldness are associated with one allele of the steroid metabolism gene CYP17. Hum. Mol. Genet. 3: 1873-1876. 11. Sarma, A.V., Dunn, R.L., Lange, L.A., Ray, A., Wang, Y. Lange, E.M. (2008). Geneticpolymorphisms in CYP17, CYP3A4, CYP19A1, SRD5A2, IGF-1, and IGFBp-3 and prostate cancer risk in african American men: the flint men, s health study prostate. 68: 296-305. 12. Morimoto, Y, Oku, Y., Sonoda, M., Haruki, A., Ito, K., Hashimoto, S. and Fukuda, A. (2007). High oxygen atmosphere improves human follicle development in organ cultures of ovarian cortical tissues in vitro. Human Reproduction. 22(12): 3170-3177. 13. Bartlett, J.M. and White, A. (2007). Extraction of DNA from whole blood. Methods in Molecular Biology.vol. 226.p29-33. 14. Yilmaz, M.B., Pazarbasi, A., Guzel, A.I., Kocaturk,-sel, S., Kasap, H., Kasap, M., Demirhan, O. (2011). Association of serum sex steroid levels and bone mineral density with CYP17 and CYP19 gene polymorphisms in postmenopausal women Turkey, Genetics and Molecular research. 10 (3) 1999-2008. 15. Warren, M.N. (1999). Clinical reviews: Evaluationof secondary amenorrhea. J. of Clinical Endocrinology & Metabolism. 81 (2), 437-442. 53
16. Ferrari, E., Bossolo, P.A., Foppa, S., Dalzano, M., Comis, S.,Morell, M.P., Pereri,V. and Mengozz, A. (2009). Prolactin secretin in polycystic ovary syndrome circadian rhythmically and dynamic aspects. GynecolEndocrinal. 12(2): 101-111. 17. Walddsteriecher, J., Santavo, N.F., Hall, J.E., Filicari, MandCrowley, W.F. (2003). Hyperfunction of hypothalamic-pituitary axis in women with polycystic ovarybsyndrome. JCMB: 165. 18. Diamanti-Kandarakis, E., Bartzis, M.I., Zapanti, E.D., Spina, G.G., Filandra, F. A.,Tsianateli, T. C., Bergiele, A.T. and Kouli, C.R. (1999). Polymorphism T C (-34bp) of gene CYP17 promoter in Greek patients with polycystic ovary syndrome. Fertil.Steril. 71: 431-435. 19. Lim, S., Kim, M., Lee, S. and Baek, K. (2002). Polymorphism of CYP17 and CYP11α for polycystic ovary syndrome in Korean population. Korean J. Genetics. 24 (4): 343-348. 20. Marszalek, B., Lacinski, M., Babych, N., Capla, E., Biernacka-Lukanty, J., Warenik- Szymankiewicz, A. and Treciak, W. H. (2001). Investigation on the genetic polymorphism in the region of CYP17 gene encoding 5 -UTR in patients with polycystic ovarian syndrome. Gynecol. Endocrinol. 15: 123-128. 21. Daneshmand, S., Weitsman, S.R., Navab, A., Jakimiuk, A.J. and Magoffin, D.A. (2002). Overexpression of theca-cell messenger RNA in polycystic ovary syndrome does not correlate with polymorphisms in the cholesterol side-chain cleavage and 17 alpha-hydroxylase /C (17-20) lyase promoter. Fertil. Steril. 77:274-280. 54